Cebadores

Autor: Micaela Cáceres 

Los cebadores son oligonucleótidos, secuencias cortas de ADN, que se unen a la molécula de ADN molde y sirven como punto de inicio para comenzar la síntesis de ADN, cuando estos cebadores o iniciadores son complementarias a secuencias de ARN mensajero y permiten que la transcriptasa reversa comience a copiar las secuencias adyacentes de ARNm por sus secuencias cortas de ADN Un cebador puede ser utilizado para muchos procesos experimentales diferentes. Se puede utilizar en una reacción de PCR para llegar a un locus determinado y así amplificarlo para su posterior análisis. Para un correcto diseño de cebadores a utilizar en secuenciación ➢ Los cebadores deberán tener, al menos, 18 bases para asegurarnos que hibriden con el ADN a secuenciar y evitar hibridaciones secundarias en el vector o en el inserto. ➢ Si se desea conocer la secuencia de ARN mensajero, el cebador debe hibridar en la conexión exón-exón para evitar la posible contaminación con ADN. ➢ El cebador debe tener una Tm entre 50 ºC-55 ºC. Se puede utilizar la siguiente formula para calcular la Tm. Tm=69.3+0.41x(%GC)-650/longitud del primer Los problemas con los cebadores específicos del molde son que la muestra puede contener distintos sitios de unión, o el cebador no unirse al molde o cantidad insuficiente del cebador o por error en el cálculo de la Tm Los cebadores para PCR son pedazos cortos de ADN de cadena sencilla, generalmente de unos 202020 nucleótidos de longitud, Es decir, les agregan secuencias que harán que se unan a cadenas opuestas del molde de ADN solo en los extremos de la región a copiar.

Fuentes:

http://www.sidalc.net/cgi-bin/wxis.exe/

https://www.quimica.es/enciclopedia/Cebador.html

https://rarediseases.info.nih.gov/GlossaryDescription/390/1

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/polymerase-chain-reaction-pcr